珈創生物 —— 生物技(ji)術(shu)服務與研發(fa)為一體的高新技(ji)術(shu)企業
優質高效透明
High quality, efficient and transparent
細胞治(zhi)療產品來(lai)源(yuan)多樣(yang)、生(sheng)物(wu)學特(te)性(xing)復雜。間充質干細胞、NK細胞、CAR-T細胞、誘導(dao)多功能(neng)干細胞等不同類(lei)別細胞治(zhi)療產品的(de)(de)生(sheng)產過(guo)程(cheng)都會涉(she)及細胞的(de)(de)離體培(pei)養。而細胞離體培(pei)養必然會涉(she)及生(sheng)物(wu)學屬性(xing)的(de)(de)變(bian)化、生(sheng)物(wu)學安(an)全(quan)性(xing)改變(bian)、外(wai)源(yuan)性(xing)污(wu)染、交叉污(wu)染等問題，這些(xie)問題嚴重影響研發初始到生(sheng)產過(guo)程(cheng)的(de)(de)進(jin)展(zhan)和成功。
根(gen)據(ju)《細(xi)(xi)(xi)胞(bao)治(zhi)(zhi)療(liao)產品(pin)研(yan)究(jiu)(jiu)與評(ping)價技術指(zhi)導(dao)(dao)原則》、《人源(yuan)性干細(xi)(xi)(xi)胞(bao)產品(pin)藥學研(yan)究(jiu)(jiu)與評(ping)價技術指(zhi)導(dao)(dao)原則（試行）》、《基因(yin)修飾(shi)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)治(zhi)(zhi)療(liao)產品(pin)非(fei)臨床研(yan)究(jiu)(jiu)與評(ping)價技術指(zhi)導(dao)(dao)原則（試行）》等(deng)指(zhi)南要求，研(yan)究(jiu)(jiu)者需建立各(ge)類細(xi)(xi)(xi)胞(bao)治(zhi)(zhi)療(liao)產品(pin)質(zhi)量控制(zhi)策略。質(zhi)量控制(zhi)一般應考(kao)慮鑒別、生物(wu)學效(xiao)力、純度、雜質(zhi)、細(xi)(xi)(xi)胞(bao)數(shu)量（活(huo)(huo)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)數(shu)、功能(neng)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)數(shu)等(deng)）和(he)一般安全(quan)性檢(jian)測(ce)（如無(wu)菌、支原體、內毒(du)素、外(wai)觀、除細(xi)(xi)(xi)胞(bao)數(shu)之(zhi)外(wai)的(de)其他外(wai)源(yuan)性異物(wu)等(deng)）等(deng)。同時(shi)也要根(gen)據(ju)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)治(zhi)(zhi)療(liao)產品(pin)特(te)性，質(zhi)量研(yan)究(jiu)(jiu)和(he)檢(jian)查應涵(han)蓋細(xi)(xi)(xi)胞(bao)特(te)性分析、特(te)定(ding)病毒(du)和(he)非(fei)特(te)定(ding)病毒(du)檢(jian)測(ce)、病毒(du)載體回復突變（復制(zhi)性病毒(du)檢(jian)測(ce)）、生物(wu)學活(huo)(huo)性（明確產品(pin)與臨床治(zhi)(zhi)療(liao)相(xiang)關的(de)生物(wu)學效(xiao)應和(he)作用(yong)機制(zhi)）等(deng)。
珈創生物可提供細胞基因療法（CGT）產品的綜合質量檢測服務。
針對(dui)如間充(chong)質干細胞(bao)產(chan)品這(zhe)類非基因編輯(ji)細胞(bao)治療產(chan)品，珈創生(sheng)物可提供(gong)：
1、微生物學安全性檢測，建立從原輔(fu)料、起始原物料（如生產(chan)用細胞、菌(jun)(jun)毒種等）到產(chan)品的(de)各(ge)(ge)方面質量安全控制方案，確保各(ge)(ge)類細胞及細胞產(chan)品滿足無細菌(jun)(jun)、真菌(jun)(jun)、支(zhi)原體、病毒污(wu)(wu)染，以及無微生物代謝產(chan)物污(wu)(wu)染的(de)質量要求(qiu)；
2、生(sheng)物學安全性檢測(ce)，建立風險(xian)預測(ce)或排除細胞(bao)治療產(chan)品進(jin)入(ru)人體后產(chan)生(sheng)成(cheng)瘤性、異常免疫反應、分化等安全性問題；
3、生物學(xue)屬(shu)性檢(jian)測，如細胞鑒別(bie)、活性、純度和(he)均一性等生物學(xue)屬(shu)性評價(jia)，降低各類(lei)細胞治(zhi)療(liao)產品因其(qi)本身(shen)具(ju)有的多樣性、異質性、復雜性等特(te)點帶來的風險(xian)；
4、生物學(xue)有效性(xing)檢(jian)測(ce)，如誘導分(fen)化能(neng)力、免疫(yi)學(xue)反應、相關活(huo)性(xing)物質分(fen)泌等來(lai)預(yu)測(ce)臨床治療效應。
針對(dui)如CAR-T細胞(bao)(bao)這類基因編輯的(de)免疫細胞(bao)(bao)治療產(chan)品，除上述一般性的(de)細胞(bao)(bao)質(zhi)(zhi)量控制(zhi)檢項(xiang)外，還需考慮生產(chan)質(zhi)(zhi)粒的(de)菌種，質(zhi)(zhi)粒、慢(man)病(bing)毒(du)以及(ji)特(te)殊生產(chan)工藝中(zhong)引入的(de)其他風(feng)險，如慢(man)病(bing)毒(du)載體(ti)回復突變（RCL檢測）、對(dui)靶細胞(bao)(bao)的(de)效應、分泌(mi)特(te)定因子、工藝相關雜質(zhi)(zhi)（磁珠(zhu)等(deng)）和產(chan)品相關雜質(zhi)(zhi)（如非功(gong)能雜細胞(bao)(bao)群等(deng)）檢測等(deng)。
珈創生物細胞治療產品技術服務檢測項目總表
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序號 |
類別(產品/項目/參數) |
產品/項目/參數 |
依據的標準（方法）名稱及編號（含年(nian)號） |
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序號(hao) |
名 稱 |
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1 |
細(xi)胞鑒別試(shi)驗 |
1.1 |
同工酶試驗(yan) |
生物(wu)制品生產檢定用動物(wu)細胞基質(zhi)制備(bei)及檢定規程《中(zhong)國藥典(dian)》2020年版(ban)三部， 生(sheng)物制(zhi)品生(sheng)產檢定用菌毒(du)種管理及質量(liang)控制(zhi)、 生(sheng)物制(zhi)品生(sheng)產檢定用動物細胞(bao)基質制(zhi)備及質量(liang)控制(zhi)、生(sheng)物制(zhi)品病毒(du)安全性控制(zhi)《中(zhong)國藥典》2020年版三部(bu) Code of Federal Regulation Title 9（9 CFR） Guidance for Industry :Characterization and Qualification of Cell Substrates and Other Biological Materials Used in the Production of Viral Vaccines for Infectious Disease Indications |
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1.2 |
染色體(ti)核型分(fen)析法(fa) |
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1.3 |
STR分析法 |
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1.4 |
細胞形態觀(guan)察法 |
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1.5 |
細(xi)胞(bao)(bao)表面標記物檢測--流式細(xi)胞(bao)(bao)術 |
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1.6 |
DNA條(tiao)形碼(ma)法 |
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1.7 |
種屬(shu)鑒定-- PCR法 |
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1.8 |
RAPD法（隨機擴增多態(tai)性DNA） |
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2 |
無菌檢查 |
2.1 |
細菌(jun)(jun)、真(zhen)菌(jun)(jun)無(wu)菌(jun)(jun)檢查--薄膜過濾法 |
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2.2 |
細(xi)菌(jun)、真菌(jun)無菌(jun)檢查--直(zhi)接(jie)接(jie)種法(fa) |
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2.3 |
分枝桿(gan)菌檢查法 |
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3 |
支原體(ti)檢查 |
3.1 |
支原體檢查--瓊脂培養(yang)法 |
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3.2 |
支原體檢(jian)查--液體培養法 |
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3.3 |
支原體檢查--DNA染色法 |
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4 |
內、外源病毒因(yin)子檢(jian)查(cha) |
4.1 |
細胞形態觀(guan)察及血吸附試驗 |
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4.2 |
體外不同指示細胞接種培(pei)養(yang)法 |
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4.3 |
動(dong)物體內接(jie)種法 |
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4.3.1 |
乳鼠腦內及腹腔接(jie)種法 |
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4.3.2 |
小鼠腦內及腹腔接種(zhong)法 |
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4.3.3 |
豚(tun)鼠腹腔接種法(fa) |
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4.3.4 |
家(jia)兔皮內及皮下接種法 |
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4.4 |
雞胚接種法 |
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4.4.1 |
雞(ji)胚卵黃(huang)囊接種法 |
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4.4.2 |
雞胚(pei)尿(niao)囊(nang)腔接種(zhong)及(ji)尿(niao)囊(nang)液(ye)血(xue)凝(ning)試驗 |
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4.5.1 |
逆轉(zhuan)錄(lu)病毒檢測--逆轉(zhuan)錄(lu)酶活性測定法 |
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4.5.2 |
逆(ni)轉(zhuan)錄(lu)病毒檢(jian)測--透射(she)電鏡觀(guan)察法 |
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4.5.3 |
逆轉錄病毒檢測--感染性(xing)試驗 |
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4.5.4 |
逆轉錄病毒(du)樣顆粒定量--透射電鏡(jing)法 |
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4.5.5 |
逆轉(zhuan)錄病毒樣顆粒定量--Q-PCR法 |
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4.6.1 |
鼠源性病毒檢測--細胞試(shi)驗 |
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4.6.2 |
鼠源性病毒檢測--動(dong)物抗體(ti)產生試驗 |
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4.6.3 |
鼠源性病毒檢測(ce)--雞胚(pei)感染(ran)試驗 |
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4.6.4 |
鼠源(yuan)性病毒檢測--Q-PCR法 |
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4.7.1 |
人源(yuan)病毒檢測--免疫熒光(guang)法 |
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4.7.2 |
人源病(bing)毒檢測(ce)--Q-PCR法 |
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4.8.1 |
牛源性病毒檢(jian)測(ce)--細胞(bao)培(pei)養(yang)法(fa) |
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4.8.2 |
牛源性(xing)病毒檢測(ce)--熒光抗體檢測(ce)法 |
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4.8.3 |
牛(niu)源性(xing)病毒(du)檢測(ce)--Q-PCR法 |
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4.9.1 |
鼠細小(xiao)病毒檢(jian)測--細胞培養(yang)法 |
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4.9.2 |
鼠(shu)細小病毒檢測--Q-PCR法 |
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4.10.1 |
豬源性(xing)病(bing)毒檢測(ce)--細胞培養法 |
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4.10.2 |
豬源性病毒檢(jian)(jian)測--熒光抗體檢(jian)(jian)測法 |
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4.10.3 |
豬(zhu)源性病毒(du)檢測--Q- PCR法 |
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4.11.1 |
杯狀(zhuang)病毒(du)（Vesivirus 2117）檢測--Q- PCR法 |
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5 |
成瘤(liu)性檢查 |
5.1 |
動(dong)物體內接種法 |
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5.2 |
軟瓊脂克(ke)隆(long)形成(cheng)試驗 |
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5.3 |
端粒酶活(huo)性檢測--Q-PCR法 |
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6 |
致瘤性檢查(cha) |
6.1 |
動(dong)物體內(nei)接種(zhong)法 |
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7 |
免疫學反應檢測(ce) |
7.1 |
淋巴細胞(bao)增殖抑制(zhi)試驗 |
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7.2 |
特定淋巴細胞(bao)亞群檢測法（Th1,Th17,Treg） |
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7.3 |
淋(lin)巴細胞分泌(mi)TNF-α抑制試驗 |
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8 |
生物學有效性評(ping)價 |
8.1 |
成骨細胞分化試(shi)驗 |
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8.2 |
成軟骨細胞分化(hua)試驗 |
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8.3 |
成脂細胞分化試驗 |
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9 |
細胞活性(xing)檢測 |
9.1 |
細(xi)胞計數和細(xi)胞存活率檢測法 |
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9.2 |
細胞生長曲線測(ce)定法 |
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9.3 |
細(xi)胞(bao)周期測定--PI染色(se)法 |
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10 |
殘留物檢測 |
10.1 |
牛血清白(bai)蛋白(bai)殘留檢(jian)測法 |
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10.2 |
抗(kang)生素殘(can)留檢測--培養法 |
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10.3 |
抗(kang)生素殘(can)留檢(jian)測--酶聯(lian)免疫法 |
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10.4 |
磁珠(zhu)殘留(liu) |
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10.5 |
Human IL-2殘留 |
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11 |
噬菌體污染(ran)檢(jian)查 |
11.1 |
透射電鏡觀察--負(fu)染色法(fa) |
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11.2 |
培養觀察(cha)--噬斑法 |
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12 |
菌(jun)種鑒定 |
12.1 |
菌株染色觀察--普通染色法(fa) |
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12.2 |
菌株(zhu)染色觀察--革蘭氏染色法 |
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12.3 |
菌落形態(tai)觀察-培養(yang)法(fa) |
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12.4 |
菌(jun)株(zhu)抗生(sheng)素(su)抗性試驗-培養法 |
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12.5 |
菌株生化特征分析--生化反應試驗(yan) |
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12.6 |
16SrRNA分析法 |
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12.7 |
18SrRNA分析法 |
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12.8 |
26SrRNA分(fen)析法 |
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12.9 |
ITS序列分析法 |
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13 |
細(xi)菌內毒素檢(jian)測 |
13.1 |
凝膠(jiao)法 |
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14 |
可復(fu)制型病毒檢測 |
14.1 |
復制性逆轉錄病毒檢測--細(xi)胞培養和 Q- PCR法(fa) |
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14.2 |
復制性慢病毒檢測--細胞培養和(he) Q- PCR/ELISA法 |
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15 |
細胞制劑檢測 |
CAR+T細胞比例 CD3+細胞比例 生物學活(huo)性(xing) 磁(ci)珠殘留 Human IL-2殘(can)留 NK細(xi)胞自(zi)然殺傷活(huo)性檢測(ce) NK細胞ADCC功能檢測(ce) NK激活性和抑制性受體檢(jian)測GzmB,perforin,CD107表達水平(ping)檢(jian)測 |
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16 |
其他(ta)檢測(ce)項目 |
流式細(xi)胞術的絕對細(xi)胞計數方法 CCK-8法則定細胞(bao)群(qun)體倍增時(shi)間 細(xi)胞克隆形成率檢測(ce)方法(fa) MSC急(ji)性毒性及抗GVHD效果評價(jia) 基(ji)于(yu)RPA-cas技術的口腔支原體檢測 基于(yu)LAMP技術的肺炎支原體的可(ke)視化檢測 Lb-cas12a蛋白的原核(he)表達及純化 基(ji)于CRISPRCas系統的多種支原(yuan)體核酸檢測 mRNA含量(liang)ribogreen熒光檢測(ce) mRNA疫苗總抗體滴度ELISA檢(jian)測法(fa) mRNA疫苗中和抗體(ti)效價(jia)假病毒中和試驗檢(jian)測法 dsRNA雜質(zhi)ELISA檢測法 馬(ma)源(yuan)性病毒檢查（3種(zhong)） 禽源性(xing)病(bing)毒檢查（3種） 昆蟲細胞(bao)CO1條形(xing)碼分(fen)析(xi)法 昆(kun)蟲細胞螺原體qPCR檢(jian)測(ce) 昆蟲桿狀病毒檢測 昆蟲黃(huang)病毒檢測 昆蟲(chong)諾達病(bing)毒(du)檢測 昆蟲彈狀病毒（內源(yuan)性(xing)/外源(yuan)性(xing)）檢(jian)測 SV40大T抗原(yuan)核酸序(xu)列檢測 腺(xian)病毒5型EIA基因檢測 胎畸瘤(liu)形成(cheng)試驗 |
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