1. 新(xin)建(jian)細胞系/株以(yi)及新(xin)型細胞基(ji)質。

2. 某些傳(chuan)代細胞(bao)已證明在一(yi)定代次內(nei)不具有成(cheng)瘤(liu)性，而超(chao)過一(yi)定代次則具有成(cheng)瘤(liu)性（如Vero）。

3. 用于疫苗生產的(de)細胞系/株應進行成(cheng)瘤(liu)(liu)性(xing)檢查(cha)，但當(dang)未經遺(yi)傳修飾的(de)二倍(bei)體細胞被(bei)證明無成(cheng)瘤(liu)(liu)性(xing)后(hou)，可以不作(zuo)為常(chang)規(gui)檢查(cha)要(yao)求。

注：已證明具有成瘤性的傳代細胞（如BHK21，CHO，C127等），或細胞類型屬成瘤性細胞（如雜交瘤細胞等），用于生產治療性產品時可以不再做成瘤性檢查。

目前使用比較廣泛的成瘤性檢查方法有動(dong)物接種法（體內）和軟瓊脂克隆(long)形成(cheng)實驗（體外）。其中，體內法(fa)為(wei)評價的(de)標準(zhun)，但對某些細胞而(er)言(yan)，體外法(fa)的(de)結果也可以作為(wei)細胞成瘤性檢查的(de)參(can)考，尤其是低(di)代次、在動(dong)物體內無(wu)成瘤性的(de)傳代細胞系。

將待檢(jian)測細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)接(jie)(jie)種(zhong)于皮下或(huo)者肌肉內注射(she)。至少(shao)觀(guan)察(cha)(cha)16周接(jie)(jie)種(zhong)部位是(shi)(shi)(shi)否(fou)有進行性(xing)結(jie)(jie)節形成，對(dui)出(chu)現的結(jie)(jie)節開始消退(tui)的動(dong)物(wu)，應在觀(guan)察(cha)(cha)期末處死。不能形成進行性(xing)結(jie)(jie)節的細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)，不視(shi)為具有成瘤(liu)(liu)性(xing)。通常用 HeLa 或(huo) HeLa S3細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)或(huo)其他(ta)已知成瘤(liu)(liu)性(xing)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)作陽性(xing)對(dui)照，且對(dui)照組至少(shao)設10只動(dong)物(wu)，試驗才(cai)視(shi)為有效(xiao)。在觀(guan)察(cha)(cha)期末，處死所有動(dong)物(wu)，對(dui)注射(she)部位及其他(ta)部位 (如心(xin)臟、肺、肝(gan)、脾、腎、腦及局部淋(lin)巴結(jie)(jie))進行觀(guan)察(cha)(cha)和組織(zhi)病(bing)理學檢(jian)查(cha)，判斷是(shi)(shi)(shi)否(fou)有接(jie)(jie)種(zhong)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)增(zeng)生，進一步判定接(jie)(jie)種(zhong)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)是(shi)(shi)(shi)否(fou)形成腫(zhong)瘤(liu)(liu)或(huo)有轉移瘤(liu)(liu)。

使用(yong)(yong)低熔點瓊(qiong)脂模擬細(xi)胞在體內的(de)微(wei)(wei)環境培(pei)養(yang)(yang)細(xi)胞，通常(chang)使用(yong)(yong)其(qi)它已知具有成瘤(liu)性(xing)(xing)的(de)細(xi)胞作(zuo)為陽(yang)性(xing)(xing)對照，對照組(zu)與(yu)實驗(yan)組(zu)同步操作(zuo)。常(chang)規培(pei)養(yang)(yang)3周(zhou)左右，培(pei)養(yang)(yang)過(guo)程中(zhong)可視(shi)情(qing)況適(shi)當(dang)地補充細(xi)胞培(pei)養(yang)(yang)液(ye)，直到陽(yang)性(xing)(xing)組(zu)在顯微(wei)(wei)鏡下(xia)(xia)明顯觀(guan)察(cha)到大量細(xi)胞集落，培(pei)養(yang)(yang)終止。使用(yong)(yong)4%多聚甲醛固定，結晶紫染(ran)色，在顯微(wei)(wei)鏡下(xia)(xia)觀(guan)察(cha)并(bing)拍照記錄。

歐洲EMA、美國FDA以及WHO針對干細胞、體細胞、成體干細胞、轉基因細胞、基因治療產品以及生產用動物細胞培養物等發布了多項指導原則。EMA在《人體細胞醫療產品的指導原則》中表示“如果可以預見細胞轉化風險則(ze)應該展開成瘤性研究，重點檢測其增(zeng)殖能(neng)力以及染色(se)體(ti)完整性”，在《干細胞醫療產品反思文件》中提到“多能干(gan)細胞(bao)和體(ti)干(gan)細胞(bao)都存在腫瘤形成風險，培養(yang)條(tiao)件可能會嚴(yan)重影響(xiang)干(gan)細胞(bao)的基因組的不穩(wen)定(ding)，延(yan)長細胞(bao)培養(yang)有助于評估成瘤性(xing)和染色體(ti)穩(wen)定(ding)性(xing)”。

 FDA指導原則認為控制hESC衍(yan)生(sheng)的(de)(de)細胞(bao)(bao)產品中未分化的(de)(de)ESC或其他細胞(bao)(bao)雜(za)質水平是成(cheng)瘤(liu)性風(feng)險評價的(de)(de)主(zhu)要方面，采用細胞(bao)(bao)增殖測(ce)(ce)定法(fa)和軟瓊脂集落形成(cheng)法(fa)測(ce)(ce)定惡性轉(zhuan)化細胞(bao)(bao)，以(yi)檢測(ce)(ce)最終產品中的(de)(de)雜(za)質細胞(bao)(bao)是否超過了最小腫(zhong)瘤(liu)產生(sheng)劑(ji)量。FDA還重點討論了臨床前實驗物種(zhong)的(de)(de)選擇和動物模(mo)型的(de)(de)預測(ce)(ce)能力，以(yi)評估(gu)植(zhi)入細胞(bao)(bao)到達移植(zhi)部位(wei)微環境中是否形成(cheng)腫(zhong)瘤(liu)，以(yi)及(ji)引起宿主(zhu)細胞(bao)(bao)和植(zhi)入細胞(bao)(bao)在各組織器官中發生(sheng)腫(zhong)瘤(liu)轉(zhuan)化的(de)(de)風(feng)險。