2020版中國藥典（ChP）雖然并未收錄NAT法作為支原體檢測方法，但其中也提到了“也可采用經國家藥品檢定機構認可的其他方法”。傳統的培養法和DNA染色法雖然有著自身的優點，但較長的檢測周期和較大的樣品檢測用量逐漸不能滿足行業快速發展的需求。NAT方法從當前支原體快速檢測方法中脫穎而出，已經被美國藥典、歐洲藥典和日本藥典收錄，并明確提到NAT方法在經過適當驗證后，可用于檢測方法補充或替代藥典方法進行放行檢測。

下表為傳統的(de)支原體檢測(ce)方法單次(ci)檢測(ce)對(dui)應樣品(pin)量和(he)檢測(ce)周期：

相對于傳統方法，Q-PCR方法只需要很少的樣品量（視靈敏度調整，按USP示例，最少可為0.2ml），若結果為陰性最快可以在24h內匯報結果。但是容易受到其他因素干擾導致出現“假陽性、假陰性”結果，所以針對該方法的驗證工作極為重要。NMPA于2017年發布了《細胞治療產品研究與評價技術指導原則》，提出可以采用快速、微量的(de)新型檢測方法。研究者應對新型檢驗方法與傳統檢測方法進行比較和評估，必要時，在產品放行檢驗時可以采用兩種檢驗方法進行相互驗證。

對(dui)于(yu)如何進行NAT方(fang)法的(de)(de)(de)驗證，目前歐洲藥典(dian)<2.6.7>和日本藥典(dian)里都詳細(xi)介紹，其內(nei)容基本一致。中檢院也發表了文章(zhang)《支原(yuan)體檢查的(de)(de)(de)核酸檢測方(fang)法及(ji)(ji)方(fang)法學(xue)驗證的(de)(de)(de)思考》，以期對(dui)我國(guo)支原(yuan)體核酸擴增法檢測的(de)(de)(de)研發者及(ji)(ji)使用(yong)者提供借鑒。支原(yuan)體NAT法須進行專(zhuan)屬性（Specificity）、檢測限（Detection Limit）和耐用(yong)性（Robustness）驗證。

● 2020版(ban)中(zhong)國藥(yao)典(dian)三部《生(sheng)物制品(pin)生(sheng)產(chan)檢(jian)定用動物細胞(bao)(bao)基質(zhi)制備及質(zhi)量控制》中(zhong)提出對(dui)于生(sheng)產(chan)用細胞(bao)(bao)，需要對(dui)主細胞(bao)(bao)庫(ku)（MCB）、工(gong)作細胞(bao)(bao)庫(ku)（WCB）、生(sheng)產(chan)終末(mo)細胞(bao)(bao)（EOPC）進行支原體檢(jian)查；通(tong)則(ze)9201 藥(yao)品(pin)微生(sheng)物檢(jian)驗替代方法驗證(zheng)指(zhi)導原則(ze)

● 《免疫細胞治療產品藥學研(yan)究與評價技術指導原則（試行）》中建(jian)議在關鍵時間(jian)點對(dui)適(shi)合的中間(jian)樣品開(kai)展支原體等(deng)安全性相(xiang)關檢(jian)(jian)測(ce)或采取相(xiang)關的措施加以控制，并且(qie)支原體同樣需要作為終產品的放(fang)行檢(jian)(jian)項

● FDA,Guidance for Industry:Characterization and Qualification of Cell Substrates and Other Biological Materials Used in the Production of Viral Vaccines for Infectious Disease Indications，中提出對(dui)于原(yuan)材料(liao)、病毒種(zhong)子(zi)、未加(jia)工的收獲液等都需要進(jin)行支(zhi)原(yuan)體控(kong)制

●  EP 10.0 2.6.7 Validation of nucleic acid amplificationtechniques (NAT) for the detection of mycoplasmas: guidelines