珈創生物(wu) —— 生物(wu)技(ji)(ji)術服務與研發(fa)為(wei)一體(ti)的高新(xin)技(ji)(ji)術企業
優質高效透明(ming)
High quality, efficient and transparent
發布時間：2022-12-05 16:32 信息來源： 閱讀次數： 次
來源于人或動物細胞系的生物技術產品的一個共同特點是存在病毒污染的風險，污染可來自原細胞系（細胞基質）本身，也可來自生產過程中偶然帶入的外源病毒，這種(zhong)污染可能產(chan)生(sheng)嚴重的臨床后果。
風險控制原則
控制(zhi)生(sheng)物技術(shu)產品的潛(qian)在病(bing)毒污染，可歸納為以下三條相互補充的原則：
a）選(xuan)擇并(bing)對選(xuan)定(ding)的(de)細胞(bao)系和(he)其(qi)他原料進行(xing)檢定(ding)，確保其(qi)不含(han)可(ke)能對人有感染(ran)和(he)/或致病(bing)作用的(de)病(bing)毒(du)。
b）評估生產工藝清除(chu)感染性病毒的能力。
c）檢測生產適當步驟的產品(pin)，確保產品(pin)未受(shou)感染性病毒(du)的污染。
各級細胞病毒安全性控制
細(xi)胞(bao)庫包括原始細(xi)胞(bao)庫（PCB，又稱細(xi)胞(bao)種(zhong)子(zi)）、主細(xi)胞(bao)庫（MCB）和工作細(xi)胞(bao)庫（WCB）。
ICH Q5A（R1）及USP-NF<1050>中對不同級別細胞進(jin)行病毒檢(jian)測的建議：
a.作為藥物生產起始細胞(bao)基質的工作細胞(bao)庫(ku)，必須進(jin)行(xing)外源病毒(du)檢測，既可(ke)對WCB進(jin)行(xing)直(zhi)接(jie)測定(ding)，也可(ke)對從(cong)WCB來源的體外傳代限度內的細胞(bao)進(jin)行(xing)分析。
b. 達到(dao)限傳代(dai)次的細胞：在體外達到(dao)傳代(dai)限度(du)的生產(chan)細胞。
c. 也可測定其(qi)他因(yin)子。
d. 若逆轉錄病毒感染試驗為陽性，則無(wu)須檢(jian)測。
e. 指使(shi)用(yong)于(yu)已(yi)受此因子感染的細胞(bao)系。
f. 對第一個WCB，此(ci)測試(shi)應在該(gai)WCB產生的達(da)到體(ti)外限傳(chuan)代次(ci)細胞(bao)上進(jin)行；以后的WCB，可直接在WCB上進(jin)行單項體(ti)外和體(ti)內測試(shi)，或(huo)在達(da)到體(ti)外限傳(chuan)代次(ci)的細胞(bao)上測試(shi)。
g. 例(li)如(ru)，MAP、RAP、HAP-通常適用于嚙齒細(xi)胞系。
h. 例如，適用于人、非人靈長目或其他細胞的測試方法。
EP10.0 <5.2.3>中對不同級別細胞系進行病毒檢測的建議：
中國藥典三部（2020版）對細胞基質(zhi)及細胞庫(ku)體系的病毒檢(jian)查的建議(yi)：
通過(guo)以上法規要求(qiu)可(ke)以看出，對于細胞基質和各(ge)級(ji)細胞庫，具體的(de)(de)檢(jian)定項(xiang)目需(xu)要根據特(te)定的(de)(de)細胞特(te)性(xing)、傳代歷史(shi)、培養過(guo)程、生產工藝等進(jin)行(xing)(xing)綜(zong)合(he)評估。根據ICH Q5A的(de)(de)要求(qiu)，應對MCB進(jin)行(xing)(xing)內源(yuan)(yuan)性(xing)和非(fei)內源(yuan)(yuan)性(xing)病毒污染的(de)(de)檢(jian)測(ce)；如果不檢(jian)測(ce)MCB，也(ye)可(ke)以使用WCB全面檢(jian)測(ce)進(jin)行(xing)(xing)替(ti)代。
生產過程中感染性病毒污染的風險控制
雖然(ran)在(zai)細(xi)胞(bao)庫階(jie)段(duan)對MCB 和(he)WCB 進(jin)行了內外源病毒因(yin)(yin)子(zi)檢(jian)測(ce)，但有些內源性病毒可能在(zai)MCB 和(he)WCB 階(jie)段(duan)未被檢(jian)出，或(huo)者在(zai)生產過程中引(yin)入(ru)偶然(ran)的(de)病毒因(yin)(yin)子(zi)污染，因(yin)(yin)而對生產終末細(xi)胞(bao)和(he)/或(huo)細(xi)胞(bao)收獲液(ye)中的(de)病毒因(yin)(yin)子(zi)進(jin)行檢(jian)測(ce)和(he)控制非常重(zhong)要(yao)。
對(dui)(dui)于UPB樣品(pin)，ICH Q5A僅要求(qiu)在進(jin)行(xing)上(shang)市注冊(ce)申請(qing)時，至少應上(shang)報三批(pi)試(shi)(shi)生(sheng)產或規模化生(sheng)產的(de)UPB研究資料，一(yi)般使(shi)用一(yi)種或幾種細(xi)胞系(xi)進(jin)行(xing)體(ti)外篩查試(shi)(shi)驗(yan)。如適用，可(ke)使(shi)用PCR試(shi)(shi)驗(yan)或其他適當的(de)方法。EMA文件《Guideline on Virus Safety Evaluation of Biotechnological Investigational Products》則(ze)指出，每一(yi)批(pi)用于臨床試(shi)(shi)驗(yan)的(de)UPB均應按照(zhao)ICH Q5A的(de)要求(qiu)進(jin)行(xing)檢測，具體(ti)不同(tong)細(xi)胞系(xi)對(dui)(dui)應的(de)檢測方法也有不同(tong)。
①如(ru)(ru)果(guo)(guo)可(ke)能，檢測樣品應(ying)包括細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)或細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)碎(sui)片以進行(xing)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)相關(guan)病(bing)毒檢測。對于灌注式細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)培養，生產(chan)商應(ying)確定并證明最適合的(de)樣品（含細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)樣品）收集步驟，收集超出批量生產(chan)代次的(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)檢測樣品也是(shi)可(ke)行(xing)的(de)；在上(shang)述情況下(xia)，應(ying)證明采用分析方法(fa)的(de)合理性；如(ru)(ru)果(guo)(guo)已(yi)有(you)敏(min)感(gan)(gan)度(du)更高的(de)方法(fa)可(ke)表明感(gan)(gan)染(ran)(ran)逆轉(zhuan)(zhuan)錄(lu)(lu)病(bing)毒檢測結果(guo)(guo)為陰(yin)性，則感(gan)(gan)染(ran)(ran)性逆轉(zhuan)(zhuan)錄(lu)(lu)病(bing)毒的(de)檢測可(ke)忽略(lve)。②僅(jin)需在研(yan)發的(de)特(te)定階段對前(qian)三批原液進行(xing)逆轉(zhuan)(zhuan)錄(lu)(lu)病(bing)毒或逆轉(zhuan)(zhuan)錄(lu)(lu)病(bing)毒顆(ke)粒的(de)檢測（如(ru)(ru)果(guo)(guo)制(zhi)備(bei)批次不足三批，也可(ke)用更少批次）。
FDA指導(dao)文件《Points to Consider in the Manufacture and Testing of Monoclonal Antibody Products for Human Use》中(zhong)則對UPB、純化中(zhong)間品和成品的(de)病毒(du)檢測都有不同要求(qiu)。對于每個批次(ci)收(shou)獲液(ye)需要進行外源病毒(du)因子、種屬特異性病毒(du)、逆轉錄病毒(du)或逆轉錄病毒(du)顆粒定量的(de)檢測。
根據中國藥典三部（2020版）要(yao)(yao)求對(dui)于(yu)人(ren)用(yong)生(sheng)物(wu)(wu)制品生(sheng)產(chan)用(yong)動物(wu)(wu)細胞基質及檢定(ding)(ding)(ding)用(yong)動物(wu)(wu)細胞，需(xu)要(yao)(yao)對(dui)MCB進(jin)行全面(mian)檢定(ding)(ding)(ding)，并且需(xu)要(yao)(yao)對(dui)EOPC進(jin)行檢定(ding)(ding)(ding)。對(dui)于(yu)人(ren)用(yong)重組(zu)單克隆抗體制品生(sheng)產(chan)，應根據生(sheng)產(chan)過程及所(suo)用(yong)材料的(de)特點，在合適(shi)的(de)階段(duan)進(jin)行常(chang)規或特定(ding)(ding)(ding)的(de)外源(yuan)病毒污染檢查。除另(ling)有(you)規定(ding)(ding)(ding)外，應對(dui)限定(ding)(ding)(ding)細胞傳代次(ci)數的(de)生(sheng)產(chan)方式，采用(yong)適(shi)當的(de)體外方法至少對(dui)3次(ci)收獲物(wu)(wu)進(jin)行外源(yuan)病毒檢測。
相關法規指導
近年來，雖然(ran)對于內(nei)外源病毒因子(zi)檢測中外申(shen)報要求(qiu)各異，但2020年1月(yue)NMPA發布的(de)“國(guo)(guo)家(jia)藥(yao)監局關(guan)于適用《Q2（R1）：分析方法論(lun)證：正(zheng)文和方法學》等(deng)11個(ge)國(guo)(guo)際人用藥(yao)品注冊(ce)技術協調(diao)會指導原則的(de)公(gong)告（2020年第7號）”中包含ICH Q5A（R1）和Q5B等(deng)文件，這表明(ming)國(guo)(guo)內(nei)法規正(zheng)逐(zhu)漸與國(guo)(guo)際相關(guan)法規接(jie)軌，給國(guo)(guo)內(nei)制藥(yao)企業進行中外雙(shuang)報帶來了便利，從而加速藥(yao)品上市。
后(hou)臺回復“病毒檢測(ce)指導”，獲取相關指導文件。
武漢珈創生物相關服務
武漢珈創(chuang)生(sheng)物(wu)技(ji)術(shu)(shu)股份有限公司，創(chuang)建(jian)于2011年(nian)，是一(yi)家集生(sheng)物(wu)技(ji)術(shu)(shu)服務與研發為(wei)一(yi)體的高新技(ji)術(shu)(shu)企業，專注于為(wei)生(sheng)物(wu)藥(yao)品/制(zhi)品的生(sheng)產企業及研發機構提供各類(lei)細(xi)(xi)胞（含重組細(xi)(xi)胞、干細(xi)(xi)胞、免(mian)疫細(xi)(xi)胞等）及原輔料的質量檢(jian)測、病毒(du)清除工藝(yi)驗證(zheng)技(ji)術(shu)(shu)服務。
質量檢測服務
武漢珈創生物可按相關法規或指導原則提供各類細(xi)胞基質(zhi)的成瘤性檢(jian)查服務(wu)，且有多種檢測方法可供選擇如動物體內接種法（裸鼠）、軟瓊脂克隆形成試驗、端粒酶活性檢測等，至今已完成數(shu)萬批(pi)次的細胞(bao)及(ji)產品檢(jian)測服務(wu)。
定制化服務
針對特殊需求，我們還可提供定制化的檢測服務，歡迎新老客戶前來咨詢。
END
