2020版中國藥典（ChP）雖然并未收錄NAT法作為支原體檢測方法，但其中也提到了“也可采用經國家藥品檢定機構認可的其他方法”。傳統的培養法和DNA染色法雖然有著自身的優點，但較長的檢測周期和較大的樣品檢測用量逐漸不能滿足行業快速發展的需求。NAT方法從當前支原體快速檢測方法中脫穎而出，已經被美國藥典、歐洲藥典和日本藥典收錄，并明確提到NAT方法在經過適當驗證后，可用于檢測方法補充或替代藥典方法進行放行檢測。

下(xia)表為傳統的支原(yuan)體檢(jian)(jian)測方法單次檢(jian)(jian)測對應樣品量(liang)和檢(jian)(jian)測周期：

相對于傳統方法，Q-PCR方法只需要很少的樣品量（視靈敏度調整，按USP示例，最少可為0.2ml），若結果為陰性最快可以在24h內匯報結果。但是容易受到其他因素干擾導致出現“假陽性、假陰性”結果，所以針對該方法的驗證工作極為重要。NMPA于2017年發布了《細胞治療產品研究與評價技術指導原則》，提出可以(yi)采用(yong)快速(su)、微量的新(xin)型(xing)檢測(ce)方法。研究者應對新型檢驗方法與傳統檢測方法進行比較和評估，必要時，在產品放行檢驗時可以采用兩種檢驗方法進行相互驗證。

對于如何進行(xing)NAT方(fang)法(fa)(fa)的驗(yan)證，目前歐洲藥典<2.6.7>和(he)日本(ben)(ben)藥典里都詳細介紹，其(qi)內(nei)容基本(ben)(ben)一致。中檢院也發表了文章《支原體檢查(cha)的核酸檢測方(fang)法(fa)(fa)及方(fang)法(fa)(fa)學(xue)驗(yan)證的思(si)考(kao)》，以期對我國支原體核酸擴增法(fa)(fa)檢測的研(yan)發者及使用(yong)者提(ti)供借鑒。支原體NAT法(fa)(fa)須進行(xing)專屬性(xing)（Specificity）、檢測限（Detection Limit）和(he)耐用(yong)性(xing)（Robustness）驗(yan)證。

● 2020版(ban)中國藥典三部《生物(wu)制(zhi)(zhi)(zhi)品(pin)生產檢定(ding)用動物(wu)細胞(bao)基質(zhi)制(zhi)(zhi)(zhi)備及質(zhi)量控制(zhi)(zhi)(zhi)》中提出對于生產用細胞(bao)，需要對主細胞(bao)庫(ku)（MCB）、工(gong)作細胞(bao)庫(ku)（WCB）、生產終末細胞(bao)（EOPC）進行支原體(ti)檢查；通則9201 藥品(pin)微(wei)生物(wu)檢驗替代方法驗證(zheng)指導原則

● 《免疫細胞治療(liao)產品(pin)(pin)藥(yao)學研究與評價(jia)技術指導原則（試行）》中建(jian)議(yi)在(zai)關(guan)鍵(jian)時間點(dian)對適合的中間樣(yang)品(pin)(pin)開展支原體等安全性相關(guan)檢測或(huo)采取相關(guan)的措施加以(yi)控(kong)制，并且支原體同樣(yang)需要作為終(zhong)產品(pin)(pin)的放行檢項

● FDA,Guidance for Industry:Characterization and Qualification of Cell Substrates and Other Biological Materials Used in the Production of Viral Vaccines for Infectious Disease Indications，中提(ti)出(chu)對于原材料、病毒種子(zi)、未(wei)加工(gong)的(de)收獲(huo)液等(deng)都需要進行支原體控制

●  EP 10.0 2.6.7 Validation of nucleic acid amplificationtechniques (NAT) for the detection of mycoplasmas: guidelines